@article{Ferreira Dias_Nunes_Cavalcante_Castro_Ferreira_Garcia_2013, place={Goiânia}, title={PCR FLUORESCENTE ASSOCIADA À ELETROFORESE CAPILAR COMO FERRAMENTA DE DIAGNÓSTICO DE BACTÉRIAS NO SEMEN}, volume={14}, url={https://revistas.ufg.br/vet/article/view/7638}, DOI={10.5216/cab.v14i3.7638}, abstractNote={<p>Este estudo avaliou o limiar de detecção da técnica de PCR aliada à eletroforese capilar para diagnóstico da <em>Brucella abortus </em>em sêmen bovino. Doses inseminantes livres de patógenos foram contaminadas experimentalmente com <em>B. abortus</em> em escalas que variavam de 10<sup>0</sup> a 10<sup>7</sup> bactérias/mL e submetidas à extração de DNA pelo método de fenol/clorofórmio. A amplificação por PCR foi realizada utilizando-se oligonucleotídeos iniciadores, previamente descritos na literatura, BF–5’gcgctcaggctgccgacgcaa3’ (cromóforo FAM) e BR–5’accagccattgcggtcggta3’ para <em>B. abortus</em>.) Os pares de oligonucleotídeos geraram fragmentos de 193 pb. Após PCR, a visualização dos fragmentos foi realizada em gel de acrilamida 8% corada pela prata e por eletroforese capilar fluorescente em equipamento automático de análise de fragmentos de DNA. A detecção de DNA de <em>B. abortus</em> em sêmen bovino através de eletroforese capilar fluorescente foi possível a partir de concentração de 10<sup>3</sup> bactérias/mL, enquanto que em gel de poliacrilamida 8% o limite de detecção foi de 10<sup>5 </sup>bactérias/mL. A<strong> </strong>eletroforese capilar demonstrou ser uma alternativa rápida, eficaz e de alta sensibilidade na detecção de DNA de <em>Brucella</em> em sêmen bovino, podendo ser uma valiosa ferramenta para a avaliação da sanidade do rebanho e para o controle de qualidade do sêmen produzido em centrais de inseminação artificial.</p><p>ALAVRAS-CHAVE:<strong> </strong><em>Brucella abortus</em>; diagnóstico; eletroforese capilar; PCR fluorescente; sêmen bovino.</p><p> </p>}, number={3}, journal={Ciência Animal Brasileira / Brazilian Animal Science}, author={Ferreira Dias, Francisca E. and Nunes, Cáris Marone and Cavalcante, Tânia Vasconcelos and Castro, Andréa A. Pires de and Ferreira, Jorge Luis and Garcia, José Fernando}, year={2013}, month={set.}, pages={366–372} }