COMPARAÇÃO DE MÉTODOS PARA EXTRAÇÃO DE DNA NA REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE PARA DETECÇÃO DE Salmonella enterica SOROVAR Enteritidis EM PRODUTOS AVÍCOLAS

Autores

  • Raphael Lucio Andreatti Filho FMVZ-UNESP
  • Guilherme Augusto Marietto Gonçalves FMVZ-UNESP
  • Adriano Sakai Okamoto FMVZ-UNESP
  • Edna Teresa de Lima FMVZ-UNESP

Palavras-chave:

PCR, Salmonella Enteritidis, ave, extração de DNA, CTAB.

Resumo

A identificação de Salmonella spp. em amostras de alimentos por diagnóstico microbiológico é demorada, com aproximadamente cinco diferentes etapas, levando cerca de 120 horas até o resultado final. A utilização da técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) pode diminuir esse período; entretanto, substâncias presentes nas amostras podem afetar a reação. O objetivo deste trabalho foi comparar a extração de DNA de Salmonella enterica sorovar Enteritidis (SE), por tratamento térmico e pelo uso do cetyltrimethil ammonium bromide (CTAB), em produtos provenientes de granjas avícolas, correspondentes a matéria prima (farinha de carne) e a suabes de arrasto experimentalmente contaminados. As amostras de DNA obtidas com as extrações foram submetidas a PCR, utilizando-se um par de oligonucleotídeos iniciadores para amplificação de DNA do gene específico de SE – Sdf 1. Comparando-se os métodos de extração, observou-se que quando do uso do CTAB detectou-se SE em 70% de matéria prima e em 80% de suabes de arrasto, enquanto com o método por tratamento térmico houve positividade em 20% de matéria prima e em 40% de suabes de arrasto. Houve detecção de SE em ambos os métodos utilizados para extração de DNA, porém, o uso de CTAB detectou maior número de amostras positivas, quando comparado com o tratamento térmico.

PALAVRAS-CHAVES: PCR, Salmonella Enteritidis, ave, extração de DNA, CTAB.

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Biografia do Autor

Raphael Lucio Andreatti Filho, FMVZ-UNESP

Médico Veterinário, graduado pela Universidade Estadual de Londrina (Londrina-PR)

Mestre em Patologia pelo Departamento de Patologia da FMVZ-USP (São Paulo-SP)

Doutor em Microbiologia pelo Departamento de Microbiologia do ICB-USP (São Paulo-SP)

Pós-Doutorado em Microbiologia Aplicada pela University Of Arkansas (EUA)

Professor Adjunto do Departamento de Clínica Veterinária da FMVZ-UNESP/Botucatu-SP

Guilherme Augusto Marietto Gonçalves, FMVZ-UNESP

Médico Veterinário e Biólogo, graduado pelo Centro Universitário Monte Serrat (Santos-SP).

Residência Médico Veterinária em Ornitopatologia na FMVZ-UNESP (Botucatu-SP).

Mestre em Ornitopatologia pelo Departamento de Clínica Veterinária da FMVZ-UNESP (Botucatu-SP).

Doutorando em Ornitopatologia pelo Departamento de Clínica Veterinária da FMVZ-UNESP (Botucatu-SP).

Adriano Sakai Okamoto, FMVZ-UNESP

Médico Veterinário, graduado Universidade de Marília (Marília-SP).

Residência Médico Veterinária em Ornitopatologia na FMVZ-UNESP (Botucatu-SP).

Mestre em Ornitopatologia pelo Departamento de Clínica Veterinária da FMVZ-UNESP (Botucatu-SP).

Doutor em Ornitopatologia pelo Departamento de Clínica Veterinária da FMVZ-UNESP (Botucatu-SP).

Professor Assistente do Departamento de Clínica Veterinária da FMVZ-UNESP/Botucatu-SP

Edna Teresa de Lima, FMVZ-UNESP

Médica Veterinária, graduada pela Universidade Federal Rural de Pernambuco (Recife-PE)

Residência Médico Veterinária em Ornitopatologia na FMVZ-UNESP (Botucatu-SP)

Mestre em Ornitopatologia pelo Ornitopatologia pelo Departamento de Clínica Veterinária da FMVZ-UNESP (Botucatu-SP)

Doutora em Ornitopatologia Ornitopatologia pelo Departamento de Clínica Veterinária da FMVZ-UNESP (Botucatu-SP).

Professora Assistente do Curso de Medicina Veterinária da UFPR/Palotina-PR

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Publicado

31-03-2011

Como Citar

Andreatti Filho, R. L., Marietto Gonçalves, G. A., Okamoto, A. S., & Lima, E. T. de. (2011). COMPARAÇÃO DE MÉTODOS PARA EXTRAÇÃO DE DNA NA REAÇÃO EM CADEIA DA POLIMERASE PARA DETECÇÃO DE Salmonella enterica SOROVAR Enteritidis EM PRODUTOS AVÍCOLAS. Ciência Animal Brasileira, 12(1), 115–119. Recuperado de https://www.revistas.ufg.br/vet/article/view/3774

Edição

Seção

Medicina Veterinária